急性白血病和多发性骨髓瘤患者血清血管内皮细胞生长因子测定及其意义

实用医学杂志２００６年第２２卷第ｌ５期　ｈｅｐａｔｉｉｔｓ　Ｂ　ｖｉｒｕｓ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ　Ｃ　ｇｅｎｏｍｅ　ｉｎ　ｃｈｒｏｎｉｃ　ｌｉｖｅｒ　ｄｉｓｅａｓｅ【Ｊ】．Ａｒｃｈ　ｖｉｕｒｓ　ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｍ－ｍｉｍｇｅｎ・ａｃｔｉｖａ￣ｄ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｋｉｎａｓｅ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　Ｖｉｏｒｌ。１９９９。ｌ４４（７）：１２９９—１３０８．　ｐａｔｈｗａｙ【Ｊ】．Ｊ　Ｖｉｒｏｌ，２００３，７７（１４）：７７０７—７７１２．　【６】ＺＨＥＮＧ　Ｙ，ＬＩ　Ｊ，ＪＯＨＮＳＯＮ　Ｄ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅ　ｇＩｌｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　（收稿：２００６—０３—０３修回：２００６—０４—２６）　急性白血病和多发性骨髓瘤患者血清血管内皮　细胞生长因子测定及其意义　倪莉邵美娟丁红香胡云良　摘要　目的：探讨血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）在急性白血病（ＡＬ）和多发性骨髓瘤（ＭＭ）中的表达和，Ｉ占床　意义。方法：采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测４１例ＡＬ初发患者【急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）３２例（分别是Ｍ。　４例、Ｍ２　４例、Ｍ３　８例、Ｍ　４例、Ｍ５　１２例）和急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）９例】和６例ＭＭ初发患者血清ＶＥＧＦ含　量，并且检测１０例获得完全缓解后的ＡＬ患者血清ＶＥＧＦ水平；同时留取４１例ＡＬ初发患者和其中１０例获得完　全缓解后ＡＬ患者骨髓液涂片，进行瑞特染色后检测骨髓原始和幼稚细胞百分数。结果：血清ＶＥＧＦ在ＡＮＬＬ、ＡＬＬ　和ＭＭ中分别是（８０７．７６±３４７．０４）、（９９８．１８　４－３８７．８０）、（１　６９２．５５±７２６．６１）ｐｇ／ｍＬ，均高于正常对照组　（４６１．４３±１２７．０５）ｐｇ／ｍＬ（Ｐ＜０．０１）；ＡＮＬＬ和ＡＬＬ之间血清ＶＥＧＦ水平差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；不同ＦＡＢ分　型血清ＶＥＧＦ含量没有差异（Ｐ＞０．０５）；１０例完全缓解的ＡＬ患者，其血清ＶＥＧＦ含量为（４９５．２８±１０２．７９）ｐｇ／　ｍＬ明显低于初发时（１　２６３．４４±４９０．３９）ｐｇ／ｍＬ（Ｐ＜０．０１）；ＡＬ组血清ＶＥＧＦ含量与其骨髓中原始幼稚白细胞　百分数具有一定相关性（ｒ＝０．５７，Ｐ＜０．０１）。结论：血清ＶＥＧＦ在ＡＬ和ＭＭ患者血清中明显升高，且ＡＬ组血清　ＶＥＧＦ与病情和预后密切相关。　关键词　白血病血管内皮生长因子类　多发性骨髓瘤　血管内皮细胞生长因子ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　月经期。　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ，ＶＥＧＦ）是一种促进血管内皮细胞有丝分　１．２　研究方法　ＡＬ组、ＭＭ组、健康对照组均采集　裂的细胞因子，为血管新生的正调节因子，在实体瘤的　外周血２　ｍＬ，以２　０００　ｒ／ｍｉｎ立即离心２０　ｍｉｎ后取上　增殖、浸润、转移及判断实体瘤预后中起重要作用¨１，　层血清０．５　ｍＬ至一２０℃冰箱冷冻保存；同时取患者　但关于其对血液系统恶性肿瘤血管新生作用研究较少，　骨髓液涂片；采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测血清　为进一步了解ＶＥＧＦ在血液恶性肿瘤患者血清中表达　ＶＥＧＦ，试剂购自深圳精美生物工程有限公司，具体　情况，进而了解血管新生在血液系统肿瘤发病中的作　操作步骤按试剂说明书进行；酶免疫检测仪为澳大　用，为血液系统肿瘤的抗血管生成靶向治疗提供理论基　利亚ＡｎｔｈＯＳ　Ｌａｂｔｅｃ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ生产的ａｎｔｈｏｓ　２０１０全　础，我们采用ＥＬＩＳＡ法对急性白血病（ＡＬ）和多发性骨　自动酶标检测仪；骨髓片常规进行瑞特染色后，分类　髓瘤（ＭＭ）患者血清中ＶＥＧＦ含量进行了测定。　计数２００个有核细胞，计算骨髓中原始及幼稚细胞　１　对象与方法　的百分数。　１．１　研究对象　ＡＬ初发患者４ｌ例，均为本院２００４　１．３　统计学分析结果均以面±ｓ表示，两组间均数　年５月至２００５年ｌ１月的住院患者，男２７例，女ｌ４　比较采用ｔ检验，多组间均数比较采用口检验，两指　例，年龄ｌ４～６５岁，其中急性非淋巴细胞白血病　标间关系用直线相关分析。　（ＡＮＬＬ）３２例，分别是Ｍ１　４例、Ｍ：４例、Ｍ３　８例、Ｍ　４　２　结果　例和Ｍ　ｌ２例；急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）９例，共有　２．１　ＡＮＬＬ、ＡＬＬ和ＭＭ患者血清ＶＥＧＦ水平３２例　ｌ０例初发患者在获得完全缓解时采取血样进行血清　ＡＮＬＬ初发患者血清ＶＥＧＦ含量为（８０７．７６±３４７．０４）　ＶＥＧＦ水平检测，本实验中另有多发性骨髓瘤（ＭＭ）患　ｐｇ／ｍＬ，明显高于正常对照组（４６１．４３±１２７．０５）ｐｇ／ｍＬ　者６例。所有患者均根据临床、细胞形态学、免疫学资　（Ｐ＜０．Ｏ１）；９例ＡＬＬ患者血清ＶＥＧＦ含量为　料及遗传学检查做出诊断。　（９９８．１８±３８７．８０）ｐｇ／ｍＬ，亦明显高于正常对照组（Ｐ　正常对照组共２３例，其中男ｌ３例，女ｌ０例，年龄　＜０．Ｏ１），虽然高于ＡＮＬＬ患者，但差异无显著性（Ｐ　ｌ６～６０岁，均为来我院健康体检者，并排除了合并肿　＞０．０５）。６例ＭＭ患者血清ＶＥＧＦ含量为（１　６９２．５５±　瘤、结缔组织病、感染性疾病等，女性均不在怀孕期及　７２６．６１）ｐｇ／ｍＬ，明显高于正常对照组（Ｐ＜０．Ｏ１），亦　明显高于ＡＮＬＬ组，差异有显著性（Ｐ＜０．０５），但与　作者单位：３２５０２７　温州医学院附属第二医院检验科　ＡＬＬ组比较差异无显著性（Ｐ＞０．０５），见表ｌ。　维普资讯 http://www.cqvip.com

实用医学杂志２００６年第２２卷第ｌ５期　表１　ＡＮＬＬ、ＡＬＬ和ＭＭ患者血清ＶＥＧＦ水平比较互±ｓ　注：与正常对照组比较。十Ｐ＜０．０１。与ＭＭ组比较。＃Ｐ＜０．０５　２．２　ＡＬ患者血清ＶＥＧＦ水平与骨髓原始幼稚细胞　数的关系　采用直线相关分析显示ＡＬ组患者血清　ＶＥＧＦ含量增多与其骨髓中原始幼稚白细胞百分数增　ＶＥＧＦ与受体结合后，激活的受体诱导酷氨酸激酶激　活，导致内皮细胞增殖和细胞迁移幢】，以往对血管新生　的研究主要集中于实体瘤，本研究采用定量的双抗体　夹心ＥＬＩＳＡ法，对ＡＬ和ＭＭ患者血清ＶＥＧＦ含量进　行测定，发现在初发的ＡＮＬＬ、ＡＬＬ及ＭＭ患者中　ＶＥＧＦ含量明显升高，间接反映了患者骨髓中血管新生　程度，并提示血管新生参与了ＡＮＬＬ和ＭＭ的发病。己　知骨髓中含有３种主要的细胞系统，即造血、内皮和基　质细胞系统，三者共同构成骨髓造血微环境，而骨髓内　皮细胞则属于基质细胞系统，通过与其他基质细胞的　加具有一定相关性，见表２。　表２　ＡＬ组骨髓原始幼稚白细胞百分数与　血清ＶＥＧＦ含量相关性　ｉ±ｓ　注：＋包括ＡＬ初发患者及ｌ０例完全缓解患者　２．３　ＦＡＢ分型与ＡＮＬＬ患者血清ＶＥＧＦ水平的关系　ＦＡＢ分型对ＡＮＬＬ患者血清ＶＥＧＦ水平无影响，见　表３。　表３　ＦＡＢ分型与ＡＮＬＬ患者血清ＶＥＧＦ水平关系　２．４　ＡＬ患者治疗前后血清ＶＥＧＦ水平比较　４１例　ＡＬ患者化疗后，其中１０例取得了完全缓解并在缓解　后检测了血清ＶＥＧＦ含量，这１０例ＡＬ患者初发时血　清ＶＥＧＦ水平为（１　２６３．４４±４９０．３９）ｐｇ／ｍＬ，缓解后　为（４９５．２８±１０２．７９）ｐｇ／ｍＬ，较初发时明显降低（Ｐ＜　０．Ｏ１），虽然仍高于正常对照组，但差异无显著性。　３　讨论　目前认为肿瘤细胞生长和数目的增多需依赖于　新生血管的形成，新生血管的形成实际上从以前已存　在的血管中再芽生出新的毛细血管，在正常机体中，　血管新生刺激因子及血管新生抑制因子处于平衡状　态，在肿瘤状态下，这种平衡被打破，肿瘤细胞分泌的　血管新生刺激因子增加，刺激内皮细胞增殖，形成新　的毛细血管以满足不断增多的肿瘤细胞对氧及营养　物质的需求，同时新生血管也为肿瘤细胞提供了代谢　产物排泄的有效途径，从而使肿瘤不断长大。在多种　参与肿瘤血管形成的细胞因子中，ＶＥＧＦ是作用最强、　特异性最好的促血管生成因子，它主要通过与血管内　皮细胞上高亲和力的受体相结合而发挥作用。当　协同作用调节胞外基质成分和多种细胞因子的分泌，　共同参与造血调控。过高的ＶＥＧＦ一方面以自分泌的　形式刺激白血病细胞生长，另一方面以旁分泌的形式　刺激血管内皮细胞增殖，形成新的血管网，为不断增殖　的白血病细胞提供营养，促进其增殖，同时增生的内皮　细胞亦分泌大量的生长因子刺激白血病细胞的生长，　自血病细胞与骨髓内皮细胞之间的这种双向作用解释　血管新生与白血病细胞增殖之间的关系Ｄ】。　本研究发现，经化疗后得到完全缓解的ＡＬ患者，　其血清ＶＥＧＦ水平与初发时相比，有了明显下降，说明　目前采用的化疗药物可有效影响自血病细胞ＶＥＧＦ的　分泌，减轻骨髓中新生血管的形成。　本研究表明ＡＮＬＬ患者和ＡＬＬ患者血清ＶＥＧＦ水　平无明显差异，而不同ＦＡＢ分型的ＡＮＬＬ患者血清　ＶＥＧＦ亦无明显差异，表明白血病细胞分型与血清　ＶＥＧＦ含量无关。　本研究还发现，ＡＬ患者血清ＶＥＧＦ含量的增高与　骨髓中原始幼稚细胞百分数的增加具有一定的相关　性，这可能与ＶＥＧＦ促进血管生成、促进肿瘤细胞生长　和增殖、抑制细胞凋亡和宿主抗肿瘤免疫，从而增加　了白血病细胞的生存能力有关Ｈ】。　综上所述，血清ＶＥＧＦ在ＡＬ和ＭＭ患者中明显　升高，且ＡＬ患者血清ＶＥＧＦ含量变化与病情和愈后　密切相关，因此本研究认为动态检测ＡＬ患者血清　ＶＥＧＦ含量变化有助于了解病情，观察疗效，而且以　ＶＥＧＦ信号链为靶点的治疗可能成为ＡＬ和ＭＭ治疗　的新途径。　４参考文献　【ｌ】ＴＯＩ　Ｍ，ＭＡＴＳＵＭＯＴＯ　Ｔ，ＢＡＮＤＯ　Ｈ．Ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ：ｉｔｓ　ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ，ｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅ，ａｎｄ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ【Ｊ】．　Ｌａｎｃｅｔ　Ｏｎｃｏｌ，２００１。２（１１）：６６７—６７３．　【２】宋强。张茂宏。李丽珍。等．急性白血病患者血清中ＶＥＧＦ水平与　临床关系的研究【Ｊ】．山东大学学报：医学版。２００２。４０（６）：５１３—　５ｌ５．　　’【３】　沈慧玲，许文林．针对ＶＥＧＦ自分泌链的白血病治疗策略【Ｊ】．　实用癌症杂志，２００５。２０（１）：１０９一ＩＩ２．　【４】ＤＩＡＳ　Ｓ，ＨＡ　丌ＯＲｌ　Ｋ。ＺＨＵ　ｚ，ｅｔ　ａ１．Ａｕｔｏｃｒｉｎｅ　ｓｔｉｍｕｌａｔｉ０ｎ　ｏｆ　ＶＥＧＦＲ・２　ａｃｔｉｖａｔｅｓ　ｈｕｍａｎ　ｌｅｕｋｅｍｉｃ　ｃｅｌｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｍｉｇｒａｔｉｏｎ【Ｊ】．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｉｎｖｅｓｔ，２０００。１０６（４）：５ＩＩ一５２１．　（收稿：２００６—０３—２３）