我培养的是卵巢癌skov3 细胞间隙有小黑点，胰酶消化后 离心 ，细菌相对变少了 ，很多残留在原来的瓶壁上，
发布网友
共3个回答
热心网友
间隙中的小黑点对于大多数细胞来说，都有这种现象。除了一些代谢产物之外，也有细胞调亡或破裂的融出物。对于skov3来说，这种现象更明显。不知道你用的是什么培养基及血清？按ATCC上的说明好像是用L15培养基还是另外一个？几年没养它搞忘记了，你可以去查查。但可以肯定的是减少这种现象使用培养基的顺序是 高糖DMEM>10>ATCC这个。10也很干净，但偏瘦，培养基不一样会导致形态的变化。
这些小黑点是可以临时性清除的。为什么说临时性的呢？因为这与细胞的培养状态是有很大的关系的。那么，怎么来清除小黑点呢？对于不一样的细胞有不一样的方法。对于skov3这种贴壁较好的细胞是可以使用消化这一招的。要注意的是，分多次多天消化，而不是一次操作之内多次消化。消化的程度是，不要用温好的胰酶来消化，冷的胰酶会对细胞消化效果稍弱，但对小黑点还是有作用的。是有很多还贴在瓶底上，但已松动，别人玩“车震”，这个时候在有胰酶覆盖的情况下，你可以玩个“手震”或在操作台上平移轻轻撞击几下，前提是要感觉大部分的细胞不被撞起。所以，这个时候很考验细胞培养操作水平了。
然后吸弃消化撞击后的培养基，并用新培养基清洗一次，再换上新培养基继续培养，等下次要传代的时候再这样操作，反复几次就能达到你需要的程度。如果你的细胞状态培养的不好，那么就可以用相反的方法，总之，肯定是要留细胞多的那部分了。
热心网友
找小黑点多的地方开高倍镜看，如果小黑点基本不移动，贴附于培养瓶表面，则是细胞的代谢产物，如各种蛋白等，如果小黑点处于高速不规则运动，则可能是污染。你的应该不是污染，细菌是不会贴附在原来的瓶壁上的，如果黑点多，应该要换培养瓶，一般代谢慢细胞养半个月换一次培养瓶，代谢快的细胞养一周即可换瓶。
热心网友
小黑点不是细菌吧，如果是细菌污染的话很快就能长一片的，细胞早就挂了，应该是细胞碎片什么的，有时候养Hela也有，不是污染就没事
